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科幻電影中將凍存若干年的生命體重新解凍復活的情節在生命科學研究過程中每一天都在上演。為了將每一種有生命的細胞較好的保存其原有的細胞特性或者長久的保存種質資源,實驗人員往往將細胞用特殊配置的細胞凍存液保存于-196℃的液氮,使得細胞暫時脫離生長狀態,等到實驗需要的時候再從液氮中取出復蘇應用。在這一看似神奇的生命存儲過程中,我們不禁要問,這是如何實現的呢?
其實,細胞凍存和復蘇的教科書和實驗手冊上面都有。小編不想再重復了。這里,我要談談應該注意的一些事項和技巧,大部分都是血淚教訓和經驗總結。都是干貨喲。
1、冷凍越慢越好,復蘇越快越好
高大上的實驗室可以使用程序冷凍儀。一切由機器代勞。屌絲實驗室就只好用人肉程序冷凍儀。具體的protocol,到處都有。小編想提醒大家的是,細胞冷凍越慢越好,寧慢勿快。做細胞冷凍前,事先留出充足的時間。
而復蘇速度越快越好。從液氮罐里取出來之后,迅速放在37°C水浴中,然后使勁搖呀搖。令其盡快融化。
2、高高興興上班,平平安安回家
細胞凍存和復蘇是細胞培養技術里面zui容易出事的部分。凡是和液氮接觸的操作,注意戴保護眼鏡和手套。zui需要小心的是:復蘇的時候,在水浴中搖呀搖的時候。有時候小瓶會爆炸的。所以,一定要戴保護眼鏡和手套。不多說了,說多了滿眼都是淚。還有,一般的凍存液中的DMSO是有毒致癌的,接觸的時候一定一定要帶好手套。這里小編為大家推薦一款的無毒的凍存液,是由日本ZENOAQ公司推出無DMSO干細胞凍存液,該款產品不含DMSO,不含血清,專為凍存各類干細胞而設計,
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