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標準曲線怎么做不好?
1、剛加完顯色劑時梯度明顯:顯色液是不是從高濃度向低濃度孔加的啊,哈哈。
2、是不是酶濃度太高,導致zui后顯色結果都是高的
3、包被-酶標系統不匹配或者酶標的非特異反應太強,或者酶標儀讀數范圍不夠,或者干脆酶標儀壞了
4、樣本中有能夠催化底物的物質,沒洗下來。
5、建議:包被、酶標重新做梯度,先用較低的濃度把梯度摸索好,然后再優化靈敏度,zui后調出所需的靈敏度、線性范圍
6、有條件的話,可以把酶免的蛋白系統移植到板式化學發光上,加完底物三分鐘讀數,這樣可能比較適合你。
7、蛋白系統靈敏度夠的話,顯色十分鐘就差不多了。
8、酶是自己標的么,見過有人把酶給標壞了出現這種情況的,HRP的話,比例不要太高,酶掛的太多了也不好的。
鈺博技術答:1,用排槍同時加顯色液,樣品濃度太高,都飽和了。
2, 試試不同的H2SO4濃度,或者其他的酸。
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