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支原體檢測方法—分離法
分離培養法:
分離培養法是支原體檢測的金標方法,其檢測度zui高。這種方法是從可疑的細胞培養體系中取樣,并接種到zui適宜支原體生長的瓊脂平板上。如果樣本中含有支原體,它們就會在這種瓊脂平板上*生長,zui終形成明顯可見的特征性菌落。分離培養法基本不會出現假陰性結果,因此被譽為支原體檢測金標準。不過分離培養法也存在兩個弊端,一是檢測時間太長,支原體要長出明顯克隆至少需要4周時間。二是盡管可以檢測絕大多數支原體種類,分離培養法也有力所不及的時候。
如果你實在不想等這么久,或者希望在分離培養法的等待過程中先拿到初步結果,你可以試一試DNA、PCR或酶學檢測方法。不過需要注意的是,上述檢測方法都不能單獨檢出所有類型的支原體,而且靈敏度也沒有分離培養法高,所以結合使用兩種方法以獲得zui可靠的檢測結果。
DNA檢測需要將可疑樣品與指示細胞共同培養,因此一般需要幾天時間。DNA檢測所用的指示細胞通常是細胞質區域較大的Vero細胞,如果原樣本中含有支原體,那么當細胞DNA被熒光染料(如Hoechst染料)染色時,就可以在指示細胞的核周圍觀察到熒光斑點或熒光顆粒。分離培養法用來檢測支原體M. hyorhinis菌株并不可靠,而DNA法可以準確的將其檢測出來。
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