大鼠腫瘤壞死因子-a(rat TNKL-a ）ELISA試劑盒檢測所需時間不到5小時，數據性價比高，大多都有現貨，種屬齊全，提供免費代測、技術指導、*售后服務。

精密度：其批內CV%，其值應小于15%  

產品別名：大鼠腫瘤壞死因子-a(rat TNKL-a ）ELISA試劑盒

英文縮寫：rat TNKL-aELISA KIT

安全性：對操作者和環境安全無害無傳染性  ，

特異性：含有與待測物相近結構部份的物質可能存在交叉反應  ，

簡便性：在定性實驗中結果判斷簡單明了，定量試驗結果計算也應簡單

大鼠腫瘤壞死因子-a(rat TNKL-a ）ELISA試劑盒問：用制備好的單克隆抗體做ELISA試驗，用的是間接、雙抗體夾心、競爭法中的哪種方法啊？請各位老師指教。測的是抗原是不是？具體的操作應該是什么

答：用的是間接ELISA。

測的不是抗原，是抗體，看看產生的抗體是否與你的目的蛋白反應。

間接ELISA的操作很多書上都有的，看看這個吧：

間接ELISA的步驟

陽性克隆的篩選采用間接ELISA方法進行平行篩選。

大鼠腫瘤壞死因子-a(rat TNKL-a ）ELISA試劑盒包被： 首先以方陣法測得純化重組蛋白的合適包被濃度，然后將蛋用pH9.6的碳酸鹽包被液稀釋至3ug/mL，每孔100uL包被ELISA板，4℃過夜。

洗滌： 將包被好的酶標板微孔中的液體全部棄去，并用PBST溶液洗滌3次，方法是先將每個微孔中加入300uL PBST溶液，放置3min后，將微孔中的PBST溶液全部倒出，再重加入相同體積新的PBST溶液，重復上面的操作，共3次。

封閉：用封閉液（PBST+5%小牛血清）4℃封閉12h。PBST洗滌3次，每次5min。

加*抗體：加入雜交瘤細胞的培養上清，100uL/孔，37℃作用2h，同時設立陽性、陰性及空白對照。

洗滌：棄去含*抗體的溶液，按照上述相同的方法用PBST溶液對酶標板進行洗滌。

大鼠腫瘤壞死因子-a(rat TNKL-a ）ELISA試劑盒加第二抗體：將酶標抗體按照使用說明中*的稀釋倍數稀釋于封閉液中，混合均勻后，向每個微孔中加入100uL，37℃溫箱中溫育1h。

洗滌：棄去含有第二抗體的溶液，按照上述相同的方法用PBST溶液對酶標板進行洗滌。

顯色：加入新鮮配置的TMB顯色液顯色，37℃作用15min，之后用終止液終止反應。

記錄：在酶標儀上測定OD450值。

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