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技術(shù)文章/ Technical Articles
ELISA試劑盒不一樣樣本的保留方式ELISA試劑盒行將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面,使酶符號的抗原抗體反響在固相表面進行的技能。該技能可用于檢查大分子抗原和特異性抗體等,具有迅速、活絡、簡潔、載體易于標準化等長處。酶聯(lián)免疫吸附試驗中血清的詳細處理保留定見:(1)要留意防止呈現(xiàn)嚴峻溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團,其有相似過氧化物的活性,因而,在以HRP為符號酶的ELISA測定中,如血清標本中血紅蛋白濃度較高,則其就很簡單在溫育過程中吸附于固相,然后與后邊加入的HRP底物...
細胞凍存的方法細胞凍存的方法:1.細胞:選對數(shù)生長期細胞,收集細胞24小時前換液一次。2.計數(shù):按常規(guī)方法把細胞制成細胞懸液,計數(shù),令細胞密度達5×106/ml,離心去上清,吸入離心管中。3.凍存液:先用培養(yǎng)液9分+DMSO1分(或甘油)配成10%的DMSO凍存液,按上法一滴滴加入離心管中,然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。4.分裝:分裝入無菌安剖中,每安剖加1.5毫升細胞懸液。5.封口:用塑料安剖時擰緊瓶口即可;如用火焰封閉安剖口后,仔細檢查,定要封嚴,必要時可浸入藍色液中觀察...
黑膠蟲抑制劑使用方法黑膠蟲污染發(fā)生的非常普遍。以下是某個同學的實驗室同黑膠蟲戰(zhàn)斗的經(jīng)驗:1.黑膠蟲是一種黑色,近乎實心,貼在細胞上的是不動的,游離的是在原地旋轉(zhuǎn)或者震動,它幾乎不能運動到其身體2倍距離以外。2.黑膠蟲的來源不確定是否是血清,但是0.22微米過濾并不能除去黑膠蟲。3.黑膠蟲污染可以在細胞培養(yǎng)箱內(nèi)傳播,尤其是相鄰的培養(yǎng)皿之間。4.黑膠蟲污染可以通過規(guī)范的細胞培養(yǎng)操作和加雙抗預防,只要做好這兩點,應該*可以避免黑膠蟲的污染。5.另外如果細胞生長速度較快,黑膠蟲的生長...
新型疫苗能夠提高流感治療性zui近一項研究開發(fā)出了新型的抵抗季節(jié)性流感的疫苗,這一技術(shù)或許能夠加快起效的速率以及為流感病毒感染提供更好的保護。幾十年來,疫苗生產(chǎn)者們利用雞蛋生產(chǎn)流感病毒毒株用于疫苗接種。然而,由于人類流感疫苗變異速率過快,因此生產(chǎn)的疫苗難以滿足實際的需求,保護效果也不佳。對此,來自杜克大學的研究者們開發(fā)出了一種方法,能夠讓人類流感病毒在生增殖過程中不發(fā)生變異,從而使得生產(chǎn)出的疫苗能夠在較短的時間范圍內(nèi)對靶標產(chǎn)生較高的親和力。相關結(jié)果發(fā)表在《mBio》雜志上。“...
PCR操作范例及反應體系的組成一、PCR操作范例在一個典型的PCR反應體系中需加入:適宜的緩沖液、微量的模板DNA、4×dNTPs、耐熱性多聚酶、Mg2和兩個合成的DNA引物。模板DNa94℃變性1min,引物與模板40~60℃退火1min,72℃延伸2min。在循環(huán)前模板預變性3~5min;在末次循環(huán)后,樣品仍需繼續(xù)延伸3~5min以上,確保擴增的DNA為雙鏈DNA。為便于了解PCR反應中各成份的組成,加入量和反應條件,使人們以此為基礎,對不同的研究對象逐項改變來找到反應條...
三種蛋白測定方法與標準曲線擬合一、蛋白濃度測定的常見方法1、考馬斯亮藍G250法測定蛋白濃度(bradford法)1)實驗原理考馬斯亮藍法測定蛋白質(zhì)濃度,是利用蛋白質(zhì)―染料結(jié)合的原理,定量的測定微量蛋白濃度的快速、靈敏的方法。考馬斯亮藍G-250存在著兩種不同的顏色形式,紅色和藍色。它和蛋白質(zhì)通過范德華力結(jié)合,在一定蛋白質(zhì)濃度范圍內(nèi),蛋白質(zhì)和染料結(jié)合符合比爾定律(Beer’slaw)。此染料與蛋白質(zhì)結(jié)合后顏色有紅色形式和藍色形式,zui大光吸收由465nm變成595nm,通過...
小鼠胚胎成纖維細胞(MEF)原代培養(yǎng)實驗實驗步驟一、取得小鼠胚胎1.性成熟母小鼠與種公鼠按1公(♂):2母(♀)比例合籠。2.每天早上觀察母小鼠口。有乳白色或蛋黃色凍膠狀物(栓)即確定為懷孕。見栓當天上午定為懷孕的0.5d。3.取懷孕12.5~14.5d母鼠,斷頸處死,無菌條件下暴露子宮。4.用鑷子提起近子宮頸端,分離子宮系膜,剪斷子宮角。5.取出整個子宮,置于有PBS的平皿內(nèi)。用PBS洗滌三次,棄除表面殘余血跡。6.沿子宮系膜側(cè)剪開子宮,取出帶有胎膜的胚胎,置于另一盛有PB...
如何確定ELISA試劑盒購買數(shù)量?購買某種試劑盒的數(shù)量可以大體按照下述公式計算:X(盒)=處理數(shù)×重復次數(shù)÷單個試劑盒能夠測定樣品的次數(shù)。但是,因為測定中操作失誤,或者對某些樣品測定結(jié)果有懷疑,需要補測,所以實際購買時總是應該從寬計算,通常可以在計算值基礎上加一個試劑盒,免得要重新購買試劑盒,耽誤時間。另外,鈺博生物不建議一次購買大量同種試劑盒,因為(1)萬一試劑盒質(zhì)量有問題,不至于造成太大損失;(2)防止儲存過久造成試劑盒失效;(3)防止因為樣品質(zhì)量問題,造成測定結(jié)果不可靠...
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