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大鼠激活素A(rat Activin A)ELISA試劑盒檢測所需時間不到5小時,數(shù)據(jù)性價比高,大多都有現(xiàn)貨,種屬齊全,提供免費代測、技術(shù)指導(dǎo)、*售后服務(wù)。
精密度:其批內(nèi)CV%,其值應(yīng)小于15%
產(chǎn)品別名:大鼠激活素A(rat Activin A)ELISA試劑盒
英文縮寫:rat Activin AELISA KIT
安全性:對操作者和環(huán)境安全無害無傳染性 ,
特異性:含有與待測物相近結(jié)構(gòu)部份的物質(zhì)可能存在交叉反應(yīng) ,
簡便性:在定性實驗中結(jié)果判斷簡單明了,定量試驗結(jié)果計算也應(yīng)簡單
大鼠激活素A(rat Activin A)ELISA試劑盒問:用制備好的單克隆抗體做ELISA試驗,用的是間接、雙抗體夾心、競爭法中的哪種方法啊?請各位老師指教。測的是抗原是不是?具體的操作應(yīng)該是什么
答:用的是間接ELISA。
測的不是抗原,是抗體,看看產(chǎn)生的抗體是否與你的目的蛋白反應(yīng)。
間接ELISA的操作很多書上都有的,看看這個吧:
間接ELISA的步驟
陽性克隆的篩選采用間接ELISA方法進行平行篩選。
大鼠激活素A(rat Activin A)ELISA試劑盒包被: 首先以方陣法測得純化重組蛋白的合適包被濃度,然后將蛋用pH9.6的碳酸鹽包被液稀釋至3ug/mL,每孔100uL包被ELISA板,4℃過夜。
洗滌: 將包被好的酶標板微孔中的液體全部棄去,并用PBST溶液洗滌3次,方法是先將每個微孔中加入300uL PBST溶液,放置3min后,將微孔中的PBST溶液全部倒出,再重加入相同體積新的PBST溶液,重復(fù)上面的操作,共3次。
封閉:用封閉液(PBST+5%小牛血清)4℃封閉12h。PBST洗滌3次,每次5min。
加*抗體:加入雜交瘤細胞的培養(yǎng)上清,100uL/孔,37℃作用2h,同時設(shè)立陽性、陰性及空白對照。
洗滌:棄去含*抗體的溶液,按照上述相同的方法用PBST溶液對酶標板進行洗滌。
大鼠激活素A(rat Activin A)ELISA試劑盒加第二抗體:將酶標抗體按照使用說明中*的稀釋倍數(shù)稀釋于封閉液中,混合均勻后,向每個微孔中加入100uL,37℃溫箱中溫育1h。
洗滌:棄去含有第二抗體的溶液,按照上述相同的方法用PBST溶液對酶標板進行洗滌。
顯色:加入新鮮配置的TMB顯色液顯色,37℃作用15min,之后用終止液終止反應(yīng)。
記錄:在酶標儀上測定OD450值。
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